为解决养殖过程中滥用抗生素现象,饲料中全面禁止添加促生长类抗生素新规于2019年7月下发,该规定实施后,哺乳羔羊腹泻率明显升高,制约了羊产业发展(朱振宇等,2022)。在此背景下,为降低羔羊患病率和死亡率,确保我国羊产业稳定发展,寻找抗生素替代品成为必然趋势。有学者研究在饲粮中添加枸杞多糖对羔羊血清免疫指标、能量代谢、营养物质表观消化率的影响(剧浩等,2022)。还有学者研究添加岩藻多糖对羔羊脏器功能(王嘉麟等,2022)、免疫功能(车小蛟等,2022)等指标的影响。近年来,关于在日粮中添加复合益生菌的相关报道不断增多。如2016年就有学者研究富硒益生菌、亚硒酸钠对羔羊生长发育以及相关指标的影响(秦顺义等,2016)。任建存等(2021)将关中奶山羊作为研究对象,分析酵母培养物对其羔羊生长性能及血液生化指标的影响。鉴于目前日粮添加复合益生菌的研究多以肉仔鸡、断奶仔猪、肉鹅等动物为主,本研究通过试验分析添加不同比例复合益生菌对哺乳羔羊饲养的影响,旨在为羔羊养殖获得更多数据参考。
1 材料与方法
(资料图片仅供参考)
1.1材料来源
复合益生菌以乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌组成,由某农大实验室分离并进行保存。其中,乳酸杆菌在MRS培养基中,枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌在NB培养基中,均在温度37℃、180r/min摇床培养24 h。前期按照乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌1∶1∶4的比例进行混合,活菌数量达到108CFU/g。发酵饲料由15%麸皮+25%豆粕+60%玉米组成,含水量45%,在恒温30℃的密封袋中连续发酵2周。发酵颗粒饲料组成和营养水平详见表 1.
表1 发酵饲料组成及营养水平(风干基础)
项目 | 含量 | 营养水平 | 含量 |
麸皮/% | 15.0 | 有机物/% | 89.35 |
去皮豆粕/% | 25.0 | 干物质/% | 51.42 |
玉米/% | 60.0 | 代谢能/(MJ/kg) | 11.95 |
合计/% | 100 | 粗蛋白/% | 19.60 |
中性洗涤纤维/% | 21.14 | ||
酸性洗涤纤维/% | 9.41 | ||
钙/% | 0.78 | ||
磷/% | 0.52 |
注:营养水平除代谢能为计算数值外,其余均为实测值。
在试验过程中,为确保最佳饲用效果,开封后的饲料在室温下储存时间≤2周,未开封饲料整体储存期≤4周。试验期间,共制作3批次发酵饲料,并对每个批次进行检验,确保检测和试验结果的准确性。
1.2试验动物分组与设计
试验选择72只遗传、生长背景一致的健康哺乳期羊羔,公母各占50%。所有参与本试验的羔羊均为15日龄。随机分组。每组公母数量一致,共4个组别,每组18个重复。各组试验动物均随母哺乳饲养,同时补饲发酵颗粒日粮。对照组日粮中不含有复合益生菌,试验1组饲喂含有5%复合益生菌的发酵饲料,试验2组饲喂含有10%复合益生菌的发酵饲料,试验3组饲喂含有15%复合益生菌的发酵饲料。预饲期为5d,正试期40 d。
1.3饲养管理
本试验开始前彻底对羊舍进行清洗、消毒,试验期间样本羔羊随母哺乳,在母子栏中饲养,其中羔羊栏规格为2.8m×2.0m×0.8m,在母羊栏和羔羊栏中间设置小门。羔羊可随意进出,母羊则无法进入到羔羊栏中。每天定时饲喂,分别于07:00和17:00.确保各组饲养环境 、管理条件相同,所有试验动物自由采食和自由饮水。
1.4指标测定
1.4.1生长性能
试验期间,每日记录给料量、余料量、损耗量,计算采食量。分别于试验第1天和试验第40天进行空腹称重,计算日平均采食量、日平均增重,计算方法如下:
日平均采食量(g/d)=(给料量-余料量)/总试验天数;
日平均增重(g/d)=(末重-初始重)/总试验天数。
1.4.2免疫功能指标
试验结束后测定4组羔羊血清免疫指标水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)含量,采血前需禁食,在空腹状态下于次日清晨采集,完成血液样本采集后严格按照ELISA试剂盒进行操作。
1.5统计学方法
采用Excel表格对数据进行整理,采用SPSS25.0软件进行单因素方差分析。采用Duncan"s进行多重比较,结果用“`X±s”表示,P<0.05表示组间差异显著,P<0.01 则表示组间差异极显著。
2 结果
2.1 复合益生菌对羔羊生长性能的影响
由表2可知,各组末重、日平均采食量、日平均增重由高到低的排序均为试验2组>试验1组>试验3组>对照组。其中,在末重、日平均采食量对比上,试验1组、试验2组显著高于对照组、试验3组(P<0.05),但试验1组和试验2组之间无显著差异(P>0.05),对照组和试验3组差异不显著(P>0.05);试验1组日平均增重显著高于对照组(P<0.05),试验2组极显著高于对照组(P<0.01),试验3组与对照组之间无显著差异(P>0.05)。
表2 日粮中添加不同比例复合益生菌发酵饲料对羔羊生长性能的影响
组别 | 初始重/kg | 末重/kg | 平均日增重/(g/d) | 日平均采食量/(g/d) |
对照组 | 6.52±0.28 | 14.30±0.97b | 194.50±17.25Bc | 154.12±11.38b |
试验1组 | 6.48±0.31 | 17.29±0.68a | 270.25±9.28b | 180.21±16.56a |
试验2组 | 6.47±0.36 | 18.34±0.96a | 296.75±15.00Aa | 183.25±17.02a |
试验3组 | 6.50±0.29 | 15.31±0.85b | 220.25±14.00Bc | 161.25±13.27b |
注:同列数据肩标不同小写字母者表示差异显著(P<0.05),同列肩标不同大写字母者表示差异极显著(P<0.01),下同。
2.2复合益生菌对羔羊免疫功能指标的影响
由表3可知,试验1、2组IgG 含量显著高于对照组(P<0.05)和试验3组(P<0.05),对照组和试验3组无显著差异(P>0.05);试验2组IgM含量显著高于试验1组(P<0.05),极显著高于对照组和试验3组(P<0.01),试验1组显著高于对照组(P<0.05);各组IgA含量比较均无显著差异(P>0.05)。
表3 日粮添加不同水平比例益生菌对羔羊血清免疫功能指标水平的影响 μg/ml
组别 | IgG | IgM | IgA |
对照组 | 1308.56±8.31b | 13.66±0.38Bc | 25.41±0.67 |
试验1组 | 1363.19±9.54a | 15.82±0.87b | 26.42±0.67 |
试验2组 | 1374.48±10.52a | 17.45±1.14Aa | 26.75±0.89 |
试验3组 | 1310.14±8.14b | 13.27±0.45Bc | 27.01±0.32 |
3 讨论
3.1不同比例复合益生菌对羔羊生长性能的影响
饲养羔羊过程中,人们发现饲料经过益生菌发酵后可以产生大量有机酸,以乳酸最为典型,使原有饲料呈酸香味。随着相关研究的不断深入。普遍认为,适当添加复合益生菌不仅能提高饲料适口性,同时也能显著增加羔羊进食量,但如果过量添加,羔羊采食量则会呈下降趋势(郭文亮等.2022)。秦顺义等(2014)研究表明,与对照组相比,复合益生菌组羔羊平均末重和日平均增重分别提升了1.94% 、14.08%,证实添加复合益生菌的饲料对羔羊生长性能有明显促进作用。卢马宁等(2021)研究表明,在4~5月龄羔羊日粮中添加优化后的复合益生菌、氨基酸,羔羊日平均采食量明显增加,但应将复合益生菌添加比例控制在40%以下。在本研究中,10%复合益生菌组(试验2组)与5%复合益生菌组(试验1组)的末重和日平均采食量无显著差异,但两组均显著高于添加15%复合益生菌组(试验3组)和对照组,说明添加不同比例复合益生菌会对羔羊采食量及末重产生影响,影响最大的是10%复合益生菌组,这与丁亚伟等(2022)的研究结果一致。本试验10%复合益生菌组日平均增重显著高于5%复合益生菌组,极显著高于15%复合益生菌组和对照组,5%组日平均增重显著高于15%复合益生菌组和对照组,说明当复合益生菌添加比例达到15%后,羔羊日平均增重不再增加,反而降至不添加复合益生菌水平。综上所述,日粮添加10%复合益生菌对羔羊生长性能产生的积极影响最大。
3.2不同比例复合益生菌对羔羊免疫功能指标的影响
血清免疫球蛋白指标包括IgG、IgM、IgA等,上述指标水平可反映动物的全身免疫功能。在免疫球蛋白指标中,IgG 含量最高,是动物机体二次体液免疫的关键指标。IgM属于动物血液中的黏附抗体,能发挥强大的杀菌作用。而IgA则直接参与动物的黏膜免疫反应,是局部抗感染过程的重要参与者。研究证实,巨噬细胞在免疫应答反应中发挥关键作用,益生菌超强的黏附力使其对肠道菌群平衡产生调节作用,可显著增加黏膜底层免疫细胞数量,提高血液抗体水平,从而增加血清IgG含量,即益生菌调节炎症反应可能是通过影响巨噬细胞极化来实现的(段冰洁等,2021 )。王福刚(2022)研究发现,10%复合益生菌培养物可显著提高肉羊血清IgG含量。本试验表明,10%复合益生菌组羔羊血清中IgG含量最高,其次是添加5%复合益生菌,而15%复合益生菌组未明显增加羔羊血清中IgG含量,与上述报道一致,而出现差异的原因可能是添加过高比例复合益生菌的发酵饲料可对动物机体产生促炎作用,反而降低了羔羊的免疫力。在IgM、IgA含量比较上,权威文献报道不同比例复合益生菌未对IgM、IgA含量产生明显影响,其水平与对照组基本持平(晨阳,2022),本研究表明,各组IgA含量无显著差异,但10%益生菌组可极显著提升羔羊血清IgM含量,IgM含量出现差异的原因可能与试验品种、日龄、试验时间有关。
4结论
在随母哺乳羔羊的补饲料颗粒中添加复合益生菌可提高羔羊生长性能,并对提高羔羊免疫力有一定帮助,但需要注意添加比例。在本试验条件下,添加10%复合益生菌可明显提高羔羊末重、日平均采食量、日平均增重以及血清IgG、IgM水平。
参考文献:略。
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全球播报:日粮添加复合益生菌对羔羊生长性能及免疫功能的影响
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